ⅠNуклеин кислотасыiкертү
Нуклеин кислотасы дезоксирибонуклеин кислотасына (ДНК) һәм рибонуклеин кислотасына (РНК) бүленә, алар арасында РНК рибосомаль РНК (rRNA), хәбәрче РНК (mRNA) һәм төрле функцияләре буенча РНК (tRNA) күчерелә.ДНК нигездә ядрода, митохондриядә һәм хлороформада тупланган, ә РНК нигездә цитоплазмада таралган.Ген экспрессының матди нигезе буларак, нуклеин кислотасын чыгару молекуляр биология тикшеренүләрендә һәм клиник молекуляр диагностикада бик мөһим роль уйный.Нуклеин кислотасын чыгаруның концентрациясе һәм чисталыгы киләсе PCR, эзлеклелек, вектор төзелеше, фермент ашкайнату һәм башка экспериментларга турыдан-туры тәэсир итәчәк.
Ⅱ Нуклеин кислотасын чыгару һәм чистарту ысулы
Hen Фенол / хлороформ алу ысулы
Фенол / хлороформ чыгару - ДНК алу өчен классик ысул, ул үрнәкләрне эшкәртү өчен ике төрле органик эреткеч куллана, су фазасында ДНК нигезендәге нуклеин кислотасын, органик фазада липидларны һәм ике этап арасындагы протеиннарны эретә.Бу ысул аз бәя, югары чисталык һәм яхшы эффект өстенлекләренә ия.Кимчелекләр катлаулы эш һәм озак вакыт.
Iz Тризол ысулы
Тризол ысулы - РНК алу өчен классик ысул.Тризол ысулы хлороформа белән центрифугациядән соң су фазасына һәм органик фазага бүленә, анда РНК су фазасында эри, су фазасы яңа EP трубасына күчерелә, изопропанол кушылганнан соң явым-төшем алына, аннары этанол чистарту.Бу ысул хайван тукымаларыннан, күзәнәкләрдән һәм бактерияләрдән РНК алу өчен яраклы.
Column rifентрифугаль багананы чистарту ысулы
Centентрифуга баганасын чистарту ысулы махсус кремний матрица адсорбция материаллары ярдәмендә ДНКны үзләштерә ала, ә РНК һәм протеин шома үтеп китә ала, аннары нуклеин кислотасын, аз тозлы PH кыйммәтен нуклеин кислотасын аеру һәм чистарту өчен югары тозлы PH куллана ала.Өстенлекләр - югары чистарту концентрациясе, югары тотрыклылык, органик эретүчегә ихтыяҗ юк, һәм аз бәя.Кимчелек - аны адым саен, күбрәк операция адымнары белән центрифугацияләргә кирәк.
④ Магнит мишәр ысулы
Магнит мишәр ысулы - күзәнәк тукымасы үрнәген лизат аша бүлү, нуклеин кислотасын үрнәккә чыгару, аннары нуклеин кислотасы молекулалары махсус магнит мишәр өслегендә рекламаланалар, ә протеиннар һәм шикәр кебек пычраклар кала. сыеклык.Күзәнәк тукымаларын бүлү адымнары аша, нуклеин кислотасы белән бәйләүче магнит мишәр, нуклеин кислотасын юу, нуклеин кислотасы элита һ.б., ниһаять, саф нуклеин кислотасы алына.Өстенлекләр - гади операция һәм кыска вакыт куллану, адым центрифугациясез.Аның түбән техник таләпләре бар һәм автоматик һәм массакүләм эшне тормышка ашыра ала.Магнит мишәр һәм нуклеин кислотасының конкрет кушылмасы чыгарылган нуклеин кислотасын югары концентрация һәм чисталык белән ясый.Кимчелек - хәзерге базар бәясе чагыштырмача кыйммәт.
⑤ Башка ысуллар
Aboveгарыда күрсәтелгән дүрт ысулга өстәп, кайнап торган ярылу, концентрацияләнгән тоз ысулы, анионик юу ысулы, УЗИ ысулы һәм энзиматик ысул һ.б.
Ⅲ Нуклеин кислотасын чыгару төре
Foregene дөньяда алдынгы туры PCR платформасына, ике баганалы РНК изоляциясе платформасына ия (ДНК гына + РНК гына).Төп продуктларга ДНК / РНК изоляциясе комплектлары, PCR һәм туры PCR реагентлары молекуляр лаборатория реагентлары керә.
R РНКның гомуми чыгарылышы
РНКны чыгаруның гомуми үрнәкләренә кан, күзәнәкләр, хайван тукымалары, үсемлекләр, вируслар һ.б. керә. Rгары чисталык һәм гомуми РНКның тулы концентрациясе РНКны чыгару аша алырга мөмкин, бу RT-PCR, чип анализы, витро тәрҗемәсендә, молекуляр клонлау, нокта блоты һәм башка экспериментлар.
Форген белән бәйлеРНК изоляциясе комплектлары
Хайваннарның гомуми РНК изоляциясе комплекты--Төрле хайван тукымаларыннан югары чисталык һәм югары сыйфатлы гомуми РНКны тиз һәм эффектив рәвештә чыгарыгыз.
Күзәнәкнең гомуми РНК изоляциясе комплекты--11 минут эчендә төрле культуралы күзәнәкләрдән югары чистартылган һәм югары сыйфатлы гомуми РНК алырга мөмкин.
Totalсемлекнең гомуми РНК изоляциясе комплекты--Аз полисахарид һәм полифенол эчтәлеге булган үсемлек үрнәкләреннән югары сыйфатлы гомуми РНКны тиз чыгарыгыз.
Вируслы РНК изоляциясе комплекты- Вируслы РНКны плазма, зарум, күзәнәксез тән сыеклыклары һәм күзәнәк культурасы супернатантлары кебек үрнәкләрдән аерыгыз һәм чистартыгыз.
② Геном ДНК чыгару
Геном ДНК чыгару үрнәкләренә туфрак, зәвык, кан, күзәнәкләр, хайван тукымалары, үсемлекләр, вируслар һ.б. керә. - эзләү эзлеклелеге һәм башка экспериментлар.
Форген белән бәйлеДНК изоляциясе комплектлары
Хайваннар тукымасы ДНК изоляциясе комплекты- Геном ДНКны күп чыганаклардан рапид чыгару һәм чистарту, мәсәлән, хайван тукымалары, күзәнәкләр һ.б.
Кан ДНК Миди комплекты (1-5мл)- antгары сыйфатлы геном ДНКны антикоагуляцияләнгән каннан чистартыгыз (1-5мл).
Buccal Swab / FTA Card DNA изоляциясе комплекты- Букаль сваб / FTA Card үрнәкләреннән югары сыйфатлы геном ДНКны тиз арада чистартыгыз.
ДНК изоляциясе комплекты- plantсемлек үрнәкләреннән (полисахаридлар һәм полифенол үсемлек үрнәкләрен кертеп) югары сыйфатлы геном ДНКны тиз арада чистартып алыгыз.
③ Плазмид чыгару
Плазмид - күзәнәкләрдәге түгәрәк кечкенә молекулаларның ДНК төре, ул ДНК рекомбинациясе өчен гомуми йөртүче.Плазмид алу ысулы - РНКны чыгару, плазмидны бактерияле геном ДНКдан аеру, чагыштырмача саф плазмид алу өчен протеин һәм башка пычракларны чыгару.
Генераль Плазмид мини комплекты- Трансформация һәм фермент ашказаны кебек гадәти молекуляр биология экспериментлары өчен үзгәртелгән бактерияләрдән югары сыйфатлы плазмид ДНКны тиз арада чистартыгыз.
④ Башка чыгару төрләре, miRNA чыгару һ.б.
Хайваннар miRNA изоляциясе комплекты- Төрле хайван тукымаларыннан һәм күзәнәкләреннән 20-200нт miRNA, siRNA, snRNA кечкенә РНК фрагментларын бик тиз һәм җиңел итеп алыгыз.
Ⅳ Нуклеин кислотасын алу һәм чистарту нәтиҗәләреs
N Нуклеин кислотасының төп структурасының бөтенлеген тәэмин итү.
Белгечләр, шикәр, липидлар һәм башка макромолекулаларның комачаулавын киметү
N Нуклеин кислотасы үрнәкләрендә ферментны тыя алырлык органик эретүче яки металл ионнарның югары концентрациясе булырга тиеш түгел.
④ РНК һәм башка нуклеин кислотасы пычрануы ДНКны чыгарганда бетерелергә тиеш, һәм киресенчә.
Пост вакыты: 24-2022 ноябрь
